新疆维吾尔自治区地方计量技术规范JJF（新）36－2019生物安全柜校准规范

Calibration Specification for Biosafety cabinet

 

   2019-11-20 发布                     2020-02-20 实施

新 疆 维 吾 尔 自 治 区 市 场 监 督 管 理 局  发 布

JJF（新）36—2019

生物安全柜校准规范

Calibration Specification for

Biosafety cabinet

  

归 口 单 位：新疆维吾尔自治区市场监督管理局

起 草 单 位：新疆维吾尔自治区计量测试研究院

  本规范委托新疆维吾尔自治区市场监督管理局负责解释

 

  

 

本规范主要起草人：            

郭  丽（新疆维吾尔自治区计量测试研究院）

钟  伟（新疆维吾尔自治区计量测试研究院）

参加起草人：  

肖玉琴（新疆维吾尔自治区计量测试研究院）

郭新宇（新疆维吾尔自治区计量测试研究院）

阿米娜·卡德尔（新疆维吾尔自治区计量测试研究院）

郑  娆（克拉玛依市中心医院）

 

  

目   录

引言·····························································( II)

1    范围························································( 1 )

2    引用文献····················································( 1 )

3    术语························································( 1 )

4    概述························································( 1 )

5    计量特性····················································( 1 )

6    校准条件····················································( 2 )

6.1  校准环境····················································( 2 )

6.2  校准用设备··················································( 2 )

7    通用技术要求················································( 3 )

8    校准项目和校准方法··········································( 3 )

8.1  噪声水平····················································( 3 )

8.2  光照度······················································( 4 )

8.3  气流风速与方向··············································( 4 )

8.4  人员保护····················································( 4 )

9    校准结果的表达···············································( 5 )

10    复校时间间隔················································( 5 )

附录A    KI-DISCUS-碘化钾测试法溶液配制方法·······················( 6 )

附录B    生物安全柜校准记录参考格式·······························( 8 )

附录C    生物安全柜校准证书内页内容（参考）························( 9 ) 

附录D    照度测量结果不确定度评定（参考）··························( 10 )

      

   

引   言

本规范的编写以JJF 1001-2011《通用计量术语及定义》、JJF 1071-2010《国家计量校 准规范编写规则》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》为基础和依据。

校准方法及计量特性等主要参考了BS EN 12469:2000《生物技术 微生物安全柜的性能标准（Biotechnology-Performance criteria for microbiological safety cabinets）》、NSF/ANSI 49-2018 《生物安全柜：设计、结构、性能和现场认证（Biosafety Cabinetry: Design, Construction, Performance, and Field Certification）》、BS EN ISO 14644-1:2015 《洁净室及相关受控环境第 1 部分：依据粒子浓度对空气洁净度分级（ Cleanrooms and associated controlled environments. Part 1: Classification of air cleanliness by particle concentration）》、BS 5726-3:1992 《微生物安全柜规范 第3部分:安装后性能规范（Microbiological safety cabinets-Part 3: Specification for performance after installation）》、WS 233-2017 《病原微生物实验室生物 安全通用准则》、YY 0569-2011 《Ⅱ级生物安全柜》、JG 170 《生物安全柜》的内容，结合实际检校验工作现状制订。

本校准规范为首次发布。

 

 

 

生物安全柜校准规范

1  范围 　　

本规范适用于Ⅱ级生物安全柜的校准。　　

2  引用文件　　

本规范引用以下文件：

YY 0569-2011   生物安全柜

JJF(新)01-2014  洁净室(区)检测规范

凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本规范。　　

3  术语

3.1  保护因子 aperture protection factor

在开放工作台上产生的空气传播污染物的暴露量与在安全柜内产生相同分散的空气传播污染物暴露量的比值，用Apf表示。

3.2  前窗 sash

位于生物安全柜前部的固定或滑动玻璃窗，在操作者和工作区之间形成屏障。

3.3丝线法  tuft method

将丝线、羊毛等纤维粘贴在要观察的模型表面或模型后的网格上，由丝线的运动(丝线转动、抖动或倒转) 可以判明气流的方向和分离区的位置以及空间涡的位置

4  概述　　

Ⅱ级生物安全柜是有前窗操作口的安全柜，操作者可以通过前窗操作口在安全柜内进行操作，对操作过程中的人员、产品及环境进行保护。前窗操作口向内吸入的负压气流用以保护人员的安全，经高效过滤器过滤的垂直下降气流用以保护产品，气流经高效过滤器过滤后排出保护环境不受污染。

5  计量特性　　

5.1 噪声：不大于67 dB。

5.2 光照度：不小于650 lx。

5.3 垂直气流风速：不小于0.25 m/s。

5.4 工作窗口气流风速：不小于0.5 m/s。

5.5 工作窗口气流方向：均匀向内。

5.6 人员保护因子：不小于1×10⁵

 注：以上指标不作为合格判定的依据，仅供校准及测量不确定度评定时参考。

6  校准条件　

6.1  环境条件：

温度：（20±10）℃；

相对湿度：≤80%

6.2  测量标准及其它设备

6.2.1  校准使用的测量设备应满足表2的技术要求。

表2  校准用设备一览表

序号	校准设备	技术要求
1	声级计	测量范围：（50～100）dB； 最大允许误差为：±1dB； 分辨率为1dB； 有“A”计权模式。
2	照度计	测量范围：（0～1000）lx； 最大允许误差为：±10%。
3	风速仪	最大允许误差为：±0.015m/s，或示值的±3%。（取较大值）
4	生物安全柜测试仪	气溶胶发生器：可以产生气溶胶，转速（28000±500）rpm ； 空气采样器：利用负压采集样品，范围（0～-7.5）MPa ； 干扰圆筒：直径（60～65）mm，长度应超出生物安全柜工作面宽度 150mm； 过滤膜：直径 25mm，孔径 3μm。
5	皮氏培养皿	直径 55mm
6	钢卷尺	测量范围(0～3)m   分度值为 1 mm最大允许误差为±（0.3+0.2L） mm，
7	放大镜	×10倍

 

7  校准项目和校准方法　　

7.1 外观

柜体表面无明显划伤、锈斑、压痕；说明功能的文字和图形符号标志应正确、 清晰、端正、牢固。

a） 前窗操作口

前窗操作口的高度标称值应在 160mm～250mm 范围内。前窗开启与关闭应轻便，在行程范围内的任何位置不产生卡死现象，不应有明显的左右或前后晃动现象，滑动应顺畅。

b） 前窗操作口报警

安全柜前窗开启高度超过或低于前窗操作口标称高度时，声音报警器应报警，联锁系统启动。当开启高度回到标称高度，报警声音和联锁系统应自动解除。

7.2 噪声水平

将声级计设置为“A”计权模式。打开安全柜的风机和照明灯，在标称速率运转时测噪声水平，将声级计放置在安全柜正面30 cm 和工作面上方沿垂直中心线38 cm 处，使柜面的防护玻璃下降至安全高度，进行测量。当环境最大的噪声不超过57 dB 时，待读数稳定后，读取声级计显示的数据。

关闭安全柜的风机和照明灯，如果有室外排气风机，让其继续运行，在相同位置测量背景噪声。当背景噪声大于 57dB 时，实测值参照仪器操作手册提供的 曲线或表进行修正，如果不适用，则用表 2 进行修正。

表 2  噪声测量值修正表

测量总噪声和背景噪声的差值（dB)	从测量总噪声中减去的数
0～2	降低背景噪声，重新测试
3	3
4～5	2
6～10	1
>10	0

 

7.3  光照度

在工作台面上，沿工作台面两内侧壁中心连线设置测量点，与侧壁最小距离为 150 mm，测量点之间的距离为 200 mm。关闭安全柜的灯，从一侧起依次测量背景照度。平均背景照度应在( 110±50) lx。

开启安全柜照明灯及风机，从一侧起依次测量安全柜照度。记录三次，取其平均值。

                                                            （1）

式中：

E ——测量值，lx；

—— 每次照度计示值，lx。

7.4  气流风速与方向

7.4.1 垂直气流风速：在标称速率运转时，在高效过滤器以下150 mm 处的截面上选取中心以及四角5个点，测量截面风速，并取其平均值作为最终结果。

7.4.2 工作窗口气流风速：在标称速率运转时。在工作窗口以下中心直线位置上选取平均分布的 5 个点，测量截面风速，并取其平均值作为最终结果。

7.4.3 工作窗口气流方向：采用丝线法在工作窗口断面检测。对工作窗口的边缘和中间区域作测试，检测其流向是否符合要求。

7.5  人员保护因子

本规范对人员保护因子的测量使用碘化钾测试法。

启动安全柜，预热30分钟后，使其处于正常操作状态。 使空气采样器吸气启动涡流盘。等待15 s后，使碘化钾进入涡流盘中部，使20 ml的碘化钾气溶胶化。气溶胶化结束15 s后采样器停止吸气。等到抽气泵完全停下后，移去过滤膜。

过滤膜将在30 s～50 s内被氯化钯饱和，所有碘化钾微粒将变为棕色的可见斑点。将过滤膜放入蒸馏水内浸透3 s～4 s ，然后将过滤膜放在清洁的滤纸上干燥。

用放大镜检查每个过滤膜，对过滤膜上的棕色斑点进行计数。以直径为 0.1mm 的斑点作为可记录的最小斑点，当斑点直径达到 0.2mm 时记录为 2 个斑点， 以此类推。

用式（2）计算释放的碘化钾粒子数 N：

N =3.1×10⁷×V                                  （2）

式中：

V —— 气溶胶发生器分散的碘化钾溶液的体积，单位为 mL；

 3.1×10⁷—— 由液滴尺寸、采样流量和涡流盘转速导出的一个常数。

用式（3）计算由每个过滤膜得到的开口保护因子值 Apf：

Apf = NF/10⁴n                                     （3）

式中：F —— 采样流量，单位为 L/min；

N — 过滤膜上的斑点数。

一般采用检测条件是：V =20 mL，F =1 00 L/min，

                          (4)

 

注： 1.为防止污染，注意确保在将过滤膜移至氯化钯溶液里用过的镊子不能用于装载空气采样器。

2.操作时应清理现场物品及无关人员，从而使被检生物安全柜处于稳定的空气层流中。

3.当对碘化钾测试法的数据有异议时可参照 YY 0569-2011 标准使用微生物法。

8  校准结果　　

8.1  校准记录

校准记录应尽可能详尽地记载测量数据和计算结果，记录格式见附录B。

8.2  校准证书

校准证书由封面和校准数据组成，经校准的测定仪应出具校准证书，校准证书应包括的信息及推荐的校准证书内页格式见附录C。

当客户要求时，可以根据计量特性进行符合性判定，并将结论列入校准证书。进行符合性判定应考虑测量不确定度。

9  复校时间间隔

生物安全柜的复校时间间隔，由送校单位根据实际使用情况自主决定，建议不超过 1 年，更换重要部件、维修后或对仪器性能有怀疑时，应重新校准。

 

 

  附录 A

KI-DISCUS-碘化钾测试法溶液配制方法

用来生成气雾剂的碘化钾是1.5%碘化钾的乙醇溶液，可以使用无水乙醇或纯度大于 95%的工业甲基化乙醇。

用于显色的氯化钯溶液时 0.1%的氯化钯盐酸溶液，盐酸的浓度为 0.1mol/L。 当用该方法测试某些专用安全柜时，不能使用碘化钾溶液作为气雾剂。它有可能给实验对象带来污染（用于微电子学研究或微电子产品生产的安全柜就属于 这一类），要求用碘化铵溶液来生成气雾剂。碘化铵溶液的浓度为 1.5%的碘化 铵乙醇溶液，可以使用无水乙醇或纯度大于 95%的工业甲基化乙醇。

 

     

附录B

生物安全柜校准记录参考格式

 

 

委托方名称

记录编号

委托方地址

校准日期

型号规格

出厂编号

制造厂

设备编号

室温

℃

湿度

%RH

技术依据

主要测量设备

外观特性：

1、噪声背景值：          柜内噪声值：           噪声水平：

2、光照度：

3、气流风速与方向：

垂直 气流风速

1

2

3

4

5

平均值

工作窗口 气流风速

1

2

3

4

5

平均值

工作窗口气流方向

4、人员保护：

采样点

项  目

测量值

1

2

3

平均值

X

污染点数

人员保护因子

Y

污染点数

人员保护因子

X1

污染点数

人员保护因子

Y1

污染点数

人员保护因子

测量结果不确定度：           

附录C

生物安全柜校准证书内页内容（参考）

1. 外观特性：                            

2. 噪声水平：                           

3. 光照度：                             

4. 气流风速与方向：

垂直气流风速	工作窗口气流风速	工作窗口气流方向

5. 人员保护：

采样点	项  目	测量值
X	污染点数
	人员保护因子
Y	污染点数
	人员保护因子
X1	污染点数
	人员保护因子
Y1	污染点数
	人员保护因子

        

     

  

附录D

照度测量结果不确定度评定

D.1  概述

D.1.1测量依据：JJF（新）XX－2019《生物安全柜校准规范》。

D.1.2环境条件：温度（20±10）℃；湿度：80≤%RH。

D.1.3测量标准：照度计，测量范围（0～1000）lx，最大允许误差±10%。

D.1.4被测对象：生物安全柜。

D.1.5测量方法：在工作台面上，沿工作台面两内侧壁中心连线设置测量点，与侧壁最小距离为 150mm，测量点之间的距离为 200mm。关闭安全柜的灯，从一侧起依次测量背景照度。平均背景照度应在( 110±50) lx。

开启安全柜照明灯及风机，从一侧起依次测量安全柜照度。记录最小值。

D.1.6 评定结果的使用：在符合上述条件的情况下，一般可直接使用本不确定度评定结果。

D.2  测量模型   

                         （D.1）

式中：

 E——测量值,d(lx)

——每次照度计示值，单位？。

D.3  全部输入量的标准不确定度评定

D.3.1  照度计读数误差引入的相对标准不确定度

   根据规范，照度计最大允许误差为±10%，假设为均匀分布，包含因子 ，则：

                           （D.2）

D.3.2  由测量重复性引入的相对标准不确定度分量 的评定

D表1为对被检生物安全柜重复测量10次的结果：

                      D表1  照度测量结果

测量次数	照度计示值（lx）
	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10
测量值	579	585	580	570	590	584	597	592	594	593

 

=586 lx               

由上表中得单次实验标准差：

在实际检定时，规定重复测量3测量的算术平均值作为测量结果，所以

              

               

D.4 合成标准不确定度的评定

    因 与 彼此独立不相关，因此

      

D.5 扩展不确定度的评定

取包含因子k=2

 

                                                          

                        ______________________________